自制抗光漂白试剂

阿平 · 发表于 2011-12-13 07:06:34

显微镜使用中荧光素对激光的激发并非能够长时间做出反应，有时候激光是有去无回，称为光漂白（photobleaching）。
在做样品的过程中使用一些试剂可以减少光漂白，而且往往能使你的样品保存时间延长，甚至能保存几年都不坏。其中商品常用的有Vectashield,Slow Fade， Prolong antifade等，但是有一些自制的土法也可同样达到很好的效果，下面列举一些：
1.  4% n-propyl gallate (Sigma) in 90%glycerol, 10% PBS
2.  1% DABCO (Sigma) in 90% glycerol, 10% PBS
3.  5 µg/ml 1,4-diazobicylclo(2,2,2)octane (DABCO) + 10–50 mg/ml n-propyl gallate + 1 mg/ml p-phenylenediamine
4. 20mM Tris pH 8.0+0.5% N-propyl gallate + 90% Glycerol
5.  2.5% DABCO +100mM Tris-HCL ph8-8.5 + 10% PVA + 25% glycerol (自干型，无需封闭，详细见附件)
6. MOWIOL + DABCO + Tris-HCL （自干型，详细见附件）
7. MOWIOL + PPD + Tris-HCL（自干型，详细见附件）

一般可以根据自己的实验室里面有什么就选择什么，实在没有，甘油本身也是不错的选择。

PVA-DABCO_Protocol.pdf (48.62 KB, 下载次数: 1106)