酵母菌和线虫模型 证明GLC7(PP1)为H3S10ph的对应磷酸酶的方法: 1.突变GLC7,结果H3S10ph增强 2.invitro assay:核小体+ 32P-标记 + PKA = H3S10ph;用IP得到HA-glc7,然后混合测试invitro dephosphorylation 3.Glc7和aurora kinase 互相对立,double RNAi可以resue phenotype
评论: 不足,没有in vivo数据支持,最好能够证明PP1就是sit 在histone上,或者PP1的regulator也行。 之考虑了kinase和phopatase的对立作用,没有考虑regulator潜在的target作用。 借鉴之处:在考虑针对kinase产生的摸个phenotype的时候,要充分考虑到该kinase可能有很多种底物,不一定你考虑的底物就是主要原因。 |